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腫瘤細(xì)胞系是一種強(qiáng)大有效的模型系統(tǒng)
發(fā)布日期：
2019-02-20
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腫瘤細(xì)胞系是連續(xù)細(xì)胞系，而連續(xù)細(xì)胞系的定義就是在體外可以穩(wěn)定的傳代半年以上。但看到ATCC的技術(shù)文章，說(shuō)高傳代數(shù)的細(xì)胞系在細(xì)胞形態(tài)學(xué)、應(yīng)激反應(yīng)、生長(zhǎng)率、蛋白表達(dá)、轉(zhuǎn)染和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)上都與低傳代數(shù)的細(xì)胞系有區(qū)別。并舉了前列腺腺癌細(xì)胞系LNCaP的例子，說(shuō)明傳代數(shù)高的細(xì)胞系（傳代80代左右）對(duì)雄激素和視黃醇的反應(yīng)不同。
腫瘤細(xì)胞系是一種強(qiáng)大有效的模型系統(tǒng)。它可以被無(wú)限培養(yǎng)增殖,而且可以通過(guò)進(jìn)行各種操作來(lái)考察癌細(xì)胞對(duì)于抗癌藥物的敏感性，從而研究抗癌藥物產(chǎn)生療效的分子機(jī)制。腫瘤學(xué)研究通過(guò)研究癌細(xì)胞系，在癌組織對(duì)于藥物的敏感性，以及相關(guān)的特異基因的作用等各方面都獲得了相當(dāng)程度的理解。近年來(lái)，通過(guò)改變癌細(xì)胞的關(guān)鍵基因組成以及對(duì)其進(jìn)行基因表達(dá)分析，病理學(xué)家們能夠進(jìn)行越來(lái)越準(zhǔn)確的病情診斷。
腫瘤細(xì)胞系傳代方法：
收到細(xì)胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
?。ㄒ唬┤绻?xì)胞未長(zhǎng)滿(mǎn)，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。
?。ǘ┤绻?xì)胞已長(zhǎng)滿(mǎn)，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細(xì)胞隨即脫落下來(lái)。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。一傳二。
腫瘤細(xì)胞系*培養(yǎng)基特別添加能有效改善細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和針對(duì)不同物種特別甄選的培養(yǎng)液，適合各類(lèi)腫瘤細(xì)胞系的體外培養(yǎng)。
